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食用菌母種培養(yǎng)基的配制

更新時(shí)間:2016-03-07      點(diǎn)擊次數(shù):4110

  母種培養(yǎng)基的配制

  1.器具:試管 刀 天平 鋁鍋 棉塞 紗布 漏斗 燒杯 量筒

  2.常用的母種培養(yǎng)基配方

 ?、亳R鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA):馬鈴薯(去皮)200g,葡萄糖20g。瓊脂20g,水1000ml,,也可用蔗糖取代葡萄糖,即為PSA培養(yǎng)基。還可以添加磷酸二氫鉀3g,硫酸鎂1.5g,維生素B1 10㎎,即為馬鈴薯綜合培養(yǎng)基。廣泛適用于各種食用菌母種的分離,培養(yǎng)和保藏。

 ?、隈R鈴薯玉米粉培養(yǎng)基:馬鈴薯(去皮)200g,蔗糖20g,玉米粉50g,瓊脂20g,磷酸二氫鉀1g,硫酸鎂0.5g,水1000ml。本配方適合于香菇、黑木耳、猴頭菌的培養(yǎng)。

 ?、垴R鈴薯黃豆粉培養(yǎng)基:馬鈴薯200g,蔗糖20g,瓊脂20g,黃豆粉20g,碳酸鈣10g,磷酸二氫鉀1g,硫酸鎂0.5g,水1000ml。適用于蘑菇、草菇。

 ?、芷咸烟堑鞍纂谁傊囵B(yǎng)基:葡萄糖20g,蛋白胨20g,瓊脂20g,水1000ml。

 ?、莸鞍纂?、酵母、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:蛋白胨2g,酵母膏2g,硫酸鎂0.5g,磷酸二氫鉀0.5g,磷酸氫二鉀1g,葡萄糖20g,維生素B1 20㎎,瓊脂20g,水1000ml。

  具體步驟

  1.計(jì)算。按照選定的培養(yǎng)基配方,計(jì)算各種成分的用量。

  2.稱(chēng)量。用天平秤取各種物質(zhì),馬鈴薯去皮去芽眼,削掉青綠部分,對(duì)不易稱(chēng)量的成分,可用玻棒和燒杯稱(chēng)重,微量元素等需要量少,難以稱(chēng)準(zhǔn)時(shí),可先配成較濃的原液,再?gòu)闹腥〕鲂枰牧俊?/span>

  3.配制。若配制合成培養(yǎng)基,先量取蒸餾水,加入瓊脂,加熱溶化;再加入稱(chēng)好的其他物質(zhì)。為避免發(fā)生沉淀造成營(yíng)養(yǎng)損失,加入的順序一般是先加緩沖劑,再依次加入主要元素、微量元素和維生素等;若各種成分均不發(fā)生沉淀,也可一起加入。

  4.煮汁,去濾液。馬鈴薯切成1㎝見(jiàn)方的小塊或2~3㎜厚的薄片,加水約1200ml煮沸,再用文火保持20~30分鐘、并適當(dāng)攪拌,使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)充分溶解出來(lái),然后用4層預(yù)濕的紗布過(guò)濾,取其濾液。

  5.補(bǔ)足水量,加藥品溶化。補(bǔ)足水量至1000ml,然后往濾液中加入瓊脂,小火加熱,攪拌至瓊脂溶解,再加入葡萄糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)使其溶化后,用PH試紙檢測(cè)其PH值,可根據(jù)需要使用氫氧化鈉和鹽酸,調(diào)整適宜的酸堿度,進(jìn)行分裝。注意開(kāi)鍋攪拌,防止溢出或焦底。

  6.分裝試管。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)趁熱分裝,可用玻璃試管,先把較大的玻璃漏斗固定在滴定架上,下接一段乳膠管和玻璃管,用彈簧夾夾住膠管。手拿試管,分裝量掌握在試管長(zhǎng)度的四分之一。注意分裝時(shí),培養(yǎng)基不能粘在試管口壁上,否則會(huì)污染棉塞。

  7.賽棉塞,注意要松緊適度。

  8.高壓鍋滅菌30分鐘。

 

 

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